生物安全工作的核心是危險度評估??梢越柚S多方法來對某一個特定的操作程序或?qū)嶒炦M行危險度評估,其中最重要的是專業(yè)判斷。危險度評估應當由那些對所涉及的微生物特性、設備和規(guī)程、動物模型以及防護設備和設施最為熟悉的人員來進行。實驗室主任或項目負責人應當負責確保進行充分和及時的危險度評估,同時也有責任與所在機構的安全委員會和生物安全工作人員密切合作,以確保有適當?shù)脑O備和設施來進行相關的研究工作。危險度評估一旦進行,還應當考慮收集與危險程度相關的新資料以及來自科學文獻的其他相關的新信息,以便必要時對危險度評估結(jié)果進行定期檢查和修訂。
??????? 進行微生物危險度評估最有用的工具之一就是列出微生物的危險度等級。然而對于一個特定的微生物來講,在進行危險度評估時僅僅參考其危險度等級是遠遠不夠的,適當時還應考慮其他一些因素,包括:
??????? 1、微生物的致病性和感染數(shù)量
??????? 2、暴露的潛在后果
??????? 3、自然感染途徑
??????? 4、實驗室操作所致的其他感染途徑(非消化道途徑、空氣傳播、食入)
??????? 5、微生物在環(huán)境中的穩(wěn)定性
??????? 6、所操作微生物的濃度和濃縮標本的容量
??????? 7、適宜宿主(人或動物)的存在
??????? 8、從動物研究和實驗室感染報告或臨床報告中得到的信息
??????? 9、計劃進行的實驗室操作(如超聲處理、氣溶膠化、離心等)
??????? 10、可能會擴大微生物的宿主范圍或改變微生物對于已知有效治療方案敏感性的所有基因技術
??????? 11、當?shù)厥欠衲苓M行有效的預防或治療干預。
??????? 根據(jù)危險度評估過程中所明確的上述信息,可以確定所計劃開展的研究工作的生物安全水平
??????? 級別,選擇合適的個體防護裝備,并結(jié)合其他安全措施制訂標準操作規(guī)范(standard operating
??????? procedure,SOP),以確保在最安全的水平下來開展工作。
????????? 每個實驗室都應該采用“安全手冊”或“操作手冊”,其中定義了已知的和潛在的危害,并規(guī)定了特殊的操作程序來避免或盡量減小這種危害。規(guī)范的微生物學操作技術是實驗室安全的基礎,而專門的實驗設備僅僅是一種補充,絕不能替代正確的操作規(guī)范。下面列出了一些最重要的概念。
??????? 一、進入規(guī)定
??????? 1、在處理危險度2 級或更高危險度級別的微生物時,在實驗室門上應標有國際通用的生物危害警告標志。
??????? 2、只有經(jīng)批準的人員方可進入實驗室工作區(qū)域。
??????? 3、實驗室的門應保持關閉。
??????? 4、兒童不應被批準或允許進入實驗室工作區(qū)域。
??????? 5、進入動物房應當經(jīng)過特別批準。
??????? 6、與實驗室工作無關的動物不得帶入實驗室。
??????? 二、人員防護
??????? 1、在實驗室工作時,任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。
??????? 2、在進行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時,應戴上合適的手套。手套用完后,應先消毒再摘除,隨后必須洗手。
??????? 3、在處理完感染性實驗材料和動物后,以及在離開實驗室工作區(qū)域前,都必須洗手。
??????? 4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害,必須戴安全眼鏡、面罩(面具)或其他防護設備。
??????? 5、嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室,(如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間)。
??????? 6、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。
??????? 7、禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。
??????? 8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。
??????? 9、在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。
??????? 三、操作規(guī)范
??????? 1、嚴禁用口吸移液管。
??????? 2、嚴禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴禁舔標簽。
??????? 3、所有的技術操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進行。
??????? 4、應限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗動物體液,皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。
??????? 5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時,必須向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實驗室應保存這些事件或事故的書面報告。
??????? 6、必須制訂關于如何處理溢出物的書面操作程序,并予以遵守執(zhí)行。
??????? 7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染(采用化學或物理學方法)。根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果,可能需要準備污水處理系統(tǒng)。
??????? 8、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染。
??????? 四、實驗室工作區(qū)
??????? 1、實驗室應保持清潔整齊,嚴禁擺放和實驗無關的物品。
??????? 2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后,都必須清除工作臺面的污染。
??????? 3、所有受到污染的材料、標本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前,必須清除污染。
??????? 4、在進行包裝和運輸時必須遵循國家和∕或國際的相關規(guī)定。
??????? 5、如果窗戶可以打開,則應安裝防止節(jié)肢動物進入的紗窗。
??????? 五、生物安全管理
??????? 1、實驗室主任(對實驗室直接負責的人員)負責制訂和采用生物安全管理計劃以及安全或操作手冊。
??????? 2、實驗室主管(向?qū)嶒炇抑魅螀R報)應當保證提供常規(guī)的實驗室安全培訓。
??????? 3、要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員,同時要求他們閱讀生物安全或操作手冊,并遵循標準的操作和規(guī)程。實驗室主管應當確保所有實驗室人員都了解這些要求。實驗室內(nèi)應備有可供取閱的安全或操作手冊。
??????? 4、應當制訂節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。
??????? 5、如有必要,應為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學評估、監(jiān)測和治療,并應妥善保存相應的醫(yī)學記錄。
??????? 六、實驗室的設計和設施
??????? 在設計實驗室和安排某些類型的實驗工作時,對于那些可能造成安全問題的情況要加以特別關注,這些情況包括:
??????? 1、氣溶膠的形成
??????? 2、處理大容量和∕或高濃度微生物
??????? 3、儀器設備過度擁擠和過多
??????? 4、嚙齒動物和節(jié)肢動物的侵擾
??????? 5、未經(jīng)允許人員進入實驗室
??????? 6、工作流程:一些特殊標本和試劑的使用。
??????? 七、設計特征
??????? 1、必須為實驗室安全運行、清潔和維護提供足夠的空間。
??????? 2、實驗室墻壁、天花板和地板應當光滑、易清潔、防滲漏并耐化學品和消毒劑的腐蝕。地板應當防滑。
??????? 3、實驗臺面應是防水的,并可耐消毒劑、酸、堿、有機溶劑和中等熱度的作用。
??????? 4、應保證實驗室內(nèi)所有活動的照明,避免不必要的反光和閃光。
??????? 5、實驗室器具應當堅固耐用,在實驗臺、生物安全柜和其他設備之間及其下面要保證有足夠的空間以便進行清潔。
??????? 6、應當有足夠的儲存空間來擺放隨時使用的物品,以免實驗臺和走廊內(nèi)混亂。在實驗室的工作區(qū)外還應當提供另外的可長期使用的儲存間。
??????? 7、應當為安全操作及儲存溶劑、放射性物質(zhì)、壓縮氣體和液化氣提供足夠的空間和設施。
??????? 8、在實驗室的工作區(qū)外應當有存放外衣和私人物品的設施。
??????? 9、在實驗室的工作區(qū)外應當有進食、飲水和休息的場所。
??????? 10、每個實驗室都應有洗手池,并最好安裝在出口處,盡可能用自來水。
??????? 11、實驗室的門應有可視窗,并達到適當?shù)姆阑鸬燃?,最好能自動關閉。
??????? 12、二級生物安全水平時,應在靠近實驗室的位置配備高壓滅菌器或其他清除污染的工具。