一、綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)方法概述

　　綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)方法是對(duì)水產(chǎn)苗種檢疫內(nèi)容中感官要求、寄生蟲性疾病和細(xì)菌性疾病的檢疫結(jié)果進(jìn)行判定的方法。主要運(yùn)用模糊數(shù)學(xué)的基本理論，將各隸屬項(xiàng)進(jìn)行模糊量化，按三種檢測(cè)結(jié)果分別賦予1、2、4的分值，然后將各隸屬項(xiàng)的分值進(jìn)行相加，計(jì)算出系統(tǒng)綜合評(píng)分，根據(jù)系統(tǒng)綜合評(píng)分的分值來判斷系統(tǒng)的綜合安全等級(jí)。

　　二、水產(chǎn)苗種檢疫結(jié)果評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

　　1、感官要求共包含五項(xiàng)指標(biāo)：

　　a、活力 b、感光能力 c、體表光潔度 d、傷殘、畸形率 e、死亡率

　　各項(xiàng)指標(biāo)的判定結(jié)果

　　感官要求 活力 感光能力 體表

　　光潔度 傷殘畸形率

　　(≤3%) 死亡率

　　(≤3%)

　　判定結(jié)果 強(qiáng)

　　不強(qiáng) 敏感

　　不敏感 干凈

　　不干凈 正常

　　不正常 正常

　　不正常

　　感官要求評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：

　?、傥屙?xiàng)指標(biāo)中全部指標(biāo)符合要求或僅有一項(xiàng)指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為1;

　?、谖屙?xiàng)指標(biāo)中其中有兩項(xiàng)或三項(xiàng)指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為2;

　?、畚屙?xiàng)指標(biāo)中其中有四項(xiàng)或全部指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為4。

　　2、寄生蟲檢測(cè)包括對(duì)寄生蟲數(shù)量的判定及其優(yōu)勢(shì)種類別的鑒定，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：

　?、俳M織內(nèi)(外)偶見寄生蟲，則將其評(píng)分結(jié)果記為1;

　?、诮M織內(nèi)(外)容易發(fā)現(xiàn)寄生蟲，但寄生蟲數(shù)量較少，則將其評(píng)分結(jié)果記為2;

　?、劢M織內(nèi)(外)極易發(fā)現(xiàn)寄生蟲，且寄生蟲數(shù)量很多，則將其評(píng)分結(jié)果記為4;

　　3、細(xì)菌檢測(cè)包括對(duì)弧菌數(shù)量的測(cè)定及其優(yōu)勢(shì)菌種類的鑒定，以下為弧菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)程序及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：

　　(1)弧菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)程序

　　①樣本處理：

　　將初樣(混合樣)放入初樣管中，用無菌扦樣器搗碎樣本制成實(shí)驗(yàn)樣本。

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　　用扦樣器扦取0.5g(0.5ml)實(shí)驗(yàn)樣本于母液管(內(nèi)含4.5ml Nacl溶液)中，制成母液，并振蕩混勻，此時(shí)母液管濃度級(jí)別為10-1。

　　用微量移液器吸取母液管中的液體0.5ml，注入A管(內(nèi)含4.5ml Nacl溶液)配成濃度級(jí)別為10-2的稀釋液，并振蕩混勻。

　　以此類推，制成B管10-3稀釋液和C管10-4的稀釋液。

　?、奂?xì)菌接種及培養(yǎng)：

　　用無菌微量移液器分別吸取ABC管中的稀釋液，向特定選擇性培養(yǎng)基TCBS上滴1滴溶液(0.05ml)，并做平行對(duì)照組，微微搖晃使液體盡量散開，待液體完全被培養(yǎng)及吸收后，放于25-28℃倒置培養(yǎng)36-48小時(shí)后取出計(jì)數(shù)。

　?、芗?xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)及計(jì)算均值

　　無論細(xì)菌菌落大小均要求計(jì)數(shù)，經(jīng)計(jì)算得每個(gè)濃度的計(jì)數(shù)平均值分別用ABC來表示。

　　⑤結(jié)果判定原則：

　　a、首先選擇平均菌落在20~200之間的數(shù)值作為檢測(cè)結(jié)果，如果只有一項(xiàng)數(shù)值介于20~200之間，則選擇該數(shù)值為最終結(jié)果，即若A屬于[20，200]，BC不屬于[20，200]，則A為最終結(jié)果;

　　b、如果有兩項(xiàng)數(shù)值介于20~200之間，則按以下原則：

　　AB屬于[20~200]，C小于20，則選B為最終結(jié)果;

　　BC屬于[20，200]，A大于200，則選C為最終結(jié)果。

　　c、如果ABC均大于200，則選C為最終結(jié)果，如果ABC均小于20，則選A為最終結(jié)果。

　　d、可以接受的結(jié)果：

　　如果AB大于200，C小于20或A大于200，BC小于20，此兩種結(jié)果可由多種原因?qū)е?，需比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照平行組來判定是否屬于上述幾種情況，如果認(rèn)為結(jié)果不能更改，則可選擇B為最終結(jié)果，B為可接受結(jié)果。

　　e、如果除了上述的這些情況外，還出現(xiàn)了其它的結(jié)果，則說明實(shí)驗(yàn)過程中存在嚴(yán)重的錯(cuò)誤，應(yīng)當(dāng)重新實(shí)驗(yàn)。

　　(2)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：

　　①弧菌總數(shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇A為最終檢測(cè)結(jié)果的記為1;

　?、诨【倲?shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇B為最終檢測(cè)結(jié)果的記為2;

　?、刍【倲?shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇C為最終檢測(cè)結(jié)果的記為4;

　　三、安全等級(jí)的劃分

　　安全等級(jí)分成五個(gè)等級(jí)，具體如下：

　　綜合安全等級(jí)評(píng)分表

　　安全等級(jí) 安全 比較安全 一般安全 比較危險(xiǎn) 危險(xiǎn)

　　綜合評(píng)分 3、4 5、6 7、8 9、10 12

　　四、等級(jí)提升及等級(jí)提升原則

　　1、等級(jí)提升原理及概念：

　　由于不同致病性細(xì)菌或寄生蟲對(duì)不同生物體造成的危害程度不同，所以每類生物體都有其專屬的致病性細(xì)菌或寄生蟲病，為了更好地體現(xiàn)這種差異性，也為了更準(zhǔn)確地出具綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果，于是引入等級(jí)提升的概念：在細(xì)菌檢測(cè)或寄生蟲檢測(cè)中，如果處于優(yōu)勢(shì)生長的細(xì)菌或寄生蟲，恰好為該品種主要細(xì)菌病或寄生蟲病中的致病性細(xì)菌或寄生蟲，則需進(jìn)行等級(jí)提升。

　　2、等級(jí)提升原則：

　?、俜秶皸l件：當(dāng)細(xì)菌檢測(cè)和寄生蟲檢測(cè)中的最終判定結(jié)果最高級(jí)，即評(píng)分為4的時(shí)候，并且所鑒定的優(yōu)勢(shì)菌(種)種類為該樣本所列的致病性病源菌(種)，則需進(jìn)行等級(jí)提升;

　?、谙到y(tǒng)等級(jí)提升：在系統(tǒng)綜合評(píng)分后，將系統(tǒng)的綜合安全等級(jí)向危險(xiǎn)等級(jí)方向提升一個(gè)等級(jí)，即如果系統(tǒng)綜合評(píng)分為7，系統(tǒng)綜合安全等級(jí)為一般安全等級(jí)，則經(jīng)過提升后，系統(tǒng)綜合安全等級(jí)為比較危險(xiǎn)等級(jí)。